由于亨廷顿舞蹈症(Huntington’s Disease, HD)的致病基因单一，近年来基因治疗的快速发展为HD患者带来了新的曙光。集萃药康自主研发了B6-hHTT CAG130-N模型，可模拟HD的病理特征及功能障碍表型，适用于HD药物治疗的筛选及安全性评价。

亨廷顿舞蹈症(Huntington’s Disease, HD)发现历史：

1858年，美国东部的宁静乡村小道上，8岁的乔治·亨廷顿 （George Huntington）第 一次看到曾多次在医生父亲口中出现的“那个病”（that disorder）：两名妇人在路上行走时身体四肢以一种奇怪的姿态“手舞足蹈”，同时面部也在不受控制的抽动着，这种病也就是后来的亨廷顿舞蹈症（Huntington’s Disease, HD)。亨廷顿舞蹈症是一种遗传几率高达50%的绝症，除了无法控制的“舞蹈”，患者还会失去说话和吞 咽的能力，变得抑郁、暴躁，相当一部分人死于自 杀。

亨廷顿在“论舞蹈症”一文中曾提到一个HD的重要特征，家族遗传性，这一点使HD在20世纪末遗传学逐渐发展后受到重点关注，科学家们随后发现人类4号染色体上Huntingtin（HTT）基因的CAG（胞嘧啶-腺嘌呤-鸟嘌呤）三核苷酸序列的异常重复是HD的主要致病原因。正常情况下CAG重复拷贝数的阈值为35-40，当大于40个时会导致CAG重复编码的氨基酸polyQ异常扩增，直接导致HTT蛋白片段错误折叠，与大量蛋白质异常互作，并积聚在细胞核和神经终末，导致神经细胞受损，从而累及脑内广泛区域^[1]。HD是一种罕见的常染色体显性遗传疾病，全世界HD的患病率约为2.7/100000，多发生于中老年人群体（平均35-50岁起病），发病呈缓慢进行性加重，最终导致死亡。临床特征为非自主运动功能异常如舞蹈样动作，认知功能障碍及情绪异常三联征；病理上则表现为基底节区萎缩和抑制性中间神经元变性，其中以尾状核和豆状核病变最为显著，这些病变会导致严重的全脑萎缩。

亨廷顿舞蹈症药物研发现状

HD患者通常会在发病13-15年后死亡，目前针对HD的治疗仅限于对症下药，缓解部分症状，缺少可以阻止或逆转HD发病进程的有效治疗或药物。例如，2021年在中国获批的治疗HD的药物丁苯那嗪片，作为囊泡单胺转运蛋白2（VMAT2）抑制剂，可以通过降低单胺类化合物，如5羟色胺等的供应来缓解HD患者的舞蹈样不自主症状，但治疗效果有限，且会导致不可逆的不良反应。由于HD的致病基因单一，近年来基因治疗的快速发展为HD患者带来了新的曙光。UniQure公司于2022年6月发布的在研基因疗法 AMT-130 在Ⅰ/Ⅱ期临床试验中低剂量组的给药数据显示，腺相关病毒5型（AAV5）载体递送microRNA药物入脑后，能够降低HD患者脑脊液中突变亨廷顿蛋白（mutated HTT，mHTT）的表达水平，且耐受性和安全性良好，有望成为首 个改变HD疾病进程的基因疗法^[2]。

集萃药康小鼠模型助力解码“死亡之舞”:B6-hHTT CAG130-N模型

如何让这支“死亡之舞”慢下脚步甚至走向结束，相应的动物模型开发和药物研发便显得至关重要。针对这一情况，集萃药康自主研发了B6-hHTT CAG130-N模型，该模型转入携带有130个CAG重复扩展的人源HTT基因片段。根据目前收集的病理学及行为学数据，B6-hHTT CAG130-N在10w时皮层和纹状体脑区即出现mHTT蛋白的聚集，12w小鼠出现显著的运动功能异常，可模拟HD的病理特征及功能障碍表型，适用于HD药物治疗的筛选及安全性评价。除了目前已收集到的表型数据之外，集萃药康也与合作者共同收集了B6-hHTT CAG130-N小鼠的药效数据，目前药效结果反馈良好，相关数据在整理中，敬请关注！

B6-hHTT CAG130-N小鼠的基因疗法(ASO药物)药效数据收集

此外，集萃药康内部近期准备开展针对B6-hHTT CAG130-N小鼠的基因疗法（ASO药物）药效数据收集，欢迎有相关药效数据收集需求的研究人员共同加入，期待与您的合作！

验证数据展示：

1. B6-hHTT CAG130-N小鼠mHTT蛋白聚集检测

图1.mHTT蛋白在B6-hHTT CAG130-N小鼠皮层和纹状体聚集

实验结果显示，由10周龄起，可在B6-hHTT CAG130-N小鼠的皮层和纹状体中发现大量聚集的mHTT蛋白。

2. B6-hHTT CAG130-N小鼠发生神经元丢失和脑重下降

图2.B6-hHTT CAG130-N小鼠神经元丢失和脑重下降

与wildtype（WT）小鼠相比，B6-hHTT CAG130-N小鼠在20w出现纹状体中棘神经元数目减少现象，22w时小鼠脑重降低。（n=6 per group, all data represent as MEAN ± SEM, ***P<0.001, two-way ANOVA, Tukey’s post hoc analysis.）

3. B6-hHTT CAG130-N小鼠体重下降

图3.B6-hHTT CAG130-N小鼠14周龄起发生体重下降

与WT小鼠相比，B6-hHTT CAG130-N雄性小鼠在10w开始出现体重拐点，14w时出现统计学差异；雌性小鼠在14w开始体重下降，18w出现统计学差异。（n=10 per group, all data represent as MEAN ± SEM, *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, two-way ANOVA, Tukey’s post hoc analysis.）

4.B6-hHTT CAG130小鼠行为学检测

图4.B6-hHTT CAG130-N小鼠出现运动障碍表型

与WT小鼠相比，B6-hHTT CAG130-N小鼠在8w时开始表现出抓力和转棒运动障碍，提示小鼠四肢力量和运动平衡能力受到损伤。（n=10 per group, all data represent as MEAN ± SEM, *P<0.05, ***P<0.001, two-way ANOVA, Tukey’s post hoc analysis.）

【参考文献】

1. Nance M. A. (2017). Genetics of Huntington disease. Handbook of clinical neurology, 144, 3–14. 

2. UniQure Biopharma B.V. . uniQure Announces Update on Low-Dose Cohort in Phase I/II Clinical Trial of AMT-130 Gene Therapy for the Treatment of Huntington’s Disease. https://www.globenewswire.com/en/news-release/2022/06/23/2467860/0/en/uniQure-Announces-Update-on-Low-Dose-Cohort-in-Phase-I-II-Clinical-Trial-of-AMT-130-Gene-Therapy-for-the-Treatment-of-Huntington-s-Disease.html; 2022.