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支气管肺发育不良bpd小鼠模型怎么构建

2023-12-18

支气管肺发育不良(BPD)模型主要用于探索BPD的发病机制,寻找高效的防治措施。

  新型支气管时没育不良动物模型的造模方法如下:

  (一)BPD 动物模型的建立:

  A、将高氧各组新生鼠 10-12 只每窝连同代母鼠一起置入温度为 25- 26 ℃,湿度 60% -65% 的自制氧箱内。

  B、测氧仪控制氧浓度维持在 60%,箱内放钙石灰吸收 CO2,防止箱内 CO2 浓度过高。

  C、空气组置于同一室内空气中,饲养条件同高氧组。

  D、每天开箱 1 小时、新生鼠称重,将氧箱中的母鼠与空气对照组互换防止母鼠氧中毒,并更换饲料、水和垫料,密切观察各组大鼠的存活情况活动度、呼吸频率、唇色等。

  E、通氧 4 天、14 天后进行检查,出现氧依赖,肺组织表现肺泡结构紊乱。肺泡增大,间隔增厚 (4 天) 或肺泡腔扩大、结构简化、间隔增厚、肺泡数量减少 (14 天) 判为合格 BPD 模型。

  (二)肺组织大体形态改变:

  A、通氧 4 天、14 天后分别从各组随机抽取 10 只大鼠,腹腔注射 10% 水合氧醛 (0.3 mL/g) 麻醉。

  B、剖开胸腔,气管插管保持肺充气状态,观察肺组织色泽变化、体积大小,是否有出血、坏死及水肿发生。

  (三)肺组织镜下形态学改变:

  A、剖开大鼠胸腔,生理盐水灌注全肺后,从左支气管注入预冷的 4% 多聚甲醛至肺膨胀至肺尖。

  B、取左肺放入多聚甲醛固定液中固定 24 小时后,梯度乙醇脱水,石蜡包埋,制作石蜡切片 (厚度 4 μm),每例标本取连续的石蜡切片 3 张。

  C、苏木素-伊红 (HE) 染色,光镜下观察各组鼠的肺组织病理学改变。

  D、每张切片随机取不重叠的 5 个视野 (×200),以 15 个视野的相应指标均值作为该例标本的 RAC 测定值。

  方法来源:丁香实验 https://pro.biomart.cn/lab-web/method/31icu2ago22ag.html