PDL1是细胞程序性死亡配体1（Programmed cell death 1 ligand 1，PDL1），也称为表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源体1（B7 homolog 1，B7-H1），由CD274基因编码，为40 kDa大小的I型跨膜蛋白。

大量研究证实，肿瘤微环境中的肿瘤细胞表面PDL1表达增高，与活化的T细胞表面的PD1结合，传递抑制性调控信号，导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡或免疫无能，从而抑制免疫反应。用抗体阻断PD1/PDL1信号通路已成为肿瘤免疫治疗的经典方法^[1-2]。

构建策略：集萃药康通过将BALB/c及C57BL/6背景小鼠的PDL1细胞外部分替换为相应的人源片段，完整保留了小鼠PDL1的细胞内部分，成功构建了PDL1人源化小鼠模型，包括单人源化小鼠BALB/c-hPDL1及C57BL/6-hPDL1和双人源化小鼠BALB/c-hPD1/hPDL1及C57BL/6- hPD1/hPDL1。PDL1人源化小鼠模型是人PDL1抑制剂药效评价及安全性评价的理想动物模型。

1. BALB/c-hPDL1:TECENTRIQ^®药效实验

在BALB/c-hPDL1小鼠皮下接种CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)肿瘤细胞系后测试抗人PDL1抗体TECENTRIQ^®（Atezolizumab）的肿瘤抑制药效。

TECENTRIQ^®（Atezolizumab）：罗氏公司上市抗肿瘤药物，抗人PD-L1抗体。

基于BALB/c-hPDL1小鼠皮下接种CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)模型的体内药效试验。将表达人源PDL1蛋白的结肠癌细胞CT26-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)培养至对数生长期后接种至6-8周龄的BALB/c-hPDL1人源化小鼠皮下，待肿瘤生长至平均体积约100 mm³时随机分为Vehicle（对照）组，Tecentriq给药组（n=10），使用相应药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。数据以Mean ± SEM形式呈现。

结果显示： Tecentriq (5 mpk)、 Tecentriq (10 mpk)、 Tecentriq (15 mpk)给药组肿瘤体积抑制率（TGI）分别为59.62%、67.73%、66.99%，对肿瘤的生长具有显著的抑制作用，并具有一定的剂量梯度依赖。

2. C57BL/6-hPDL1:TECENTRIQ^®药效实验

在B6-hPDL1小鼠皮下接种MC38-hPDL1肿瘤细胞系后测试抗人PDL1抗体TECENTRIQ^®（Atezolizumab）的肿瘤抑制药效。

小鼠肿瘤生长曲线 

基于B6-hPDL1小鼠皮下接种MC38-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)模型的体内药效试验。将表达人源PDL1蛋白的结肠癌细胞MC38-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)培养至对数生长期后接种至6-8周龄的B6-hPDL1人源化小鼠皮下，待肿瘤生长至平均体积约100 mm³时随机分为Vehicle（对照）组，Tecentriq给药组（n=8），使用相应药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。数据以Mean ± SEM形式呈现。

结果显示： Tecentriq药物对肿瘤生长有抑制作用（TGI=87%）。

结果表明：C57BL/6-/hPDL1小鼠是评价抗人PD1抗体、抗人PDL1抗体及联合给药的抗肿瘤作用的理想模型。

3. C57BL/6-hPD1/hPDL1：KEYTRUDA®及TECENTRIQ®药效实验

在B6-hPD1/hPDL1小鼠模型皮下接种MC38-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体KEYTRUDA^®（Pembrolizumab）及抗人PD-L1抗体TECENTRIQ^®（atezolizumab）肿瘤抑制药效。

上图：Tecentriq抗肿瘤药效

上图：Keytruda抗肿瘤药效

基于C57BL/6-hPD1/hPDL1小鼠皮下接种MC38-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)模型的体内药效实验。将对数生长期的小鼠结肠癌细胞MC38-hPDL1(Tg)-mPDL1(KO)接种至6-8周龄C57BL/6-hPD1/hPDL1小鼠皮下，待肿瘤生长至平均体积约100 mm³左右时随机分为Tecentriq (1 mpk)、Tecentriq (3 mpk)、 Tecentriq (10 mpk)、Keytruda (1 mpk)、Keytruda (3 mpk)、Keytruda (10 mpk) 给药组(n=8)，并使用相应的药物进行治疗。每3天给药1次，共给药6次。

结果显示：Tecentriq (1 mpk)、 Tecentriq (3 mpk)、 Tecentriq (10 mpk) 给药组肿瘤体积抑制率（TGI）分别为48.26%、67.77%、88.52% ；Keytruda (1 mpk)、 Keytruda (3 mpk)、 Keytruda (10 mpk)给药组的TGI分别为79.63%、96.45%、99.52% ，两种抗体均对肿瘤的生长具有显著的抑制作用，并具有一定的剂量梯度依赖。

结果表明：C57BL/6-hPD1/hPDL1小鼠是评价抗人PD1抗体、抗人PDL1抗体及联合给药的抗肿瘤作用的理想模型。

参考文献

[1] Immunotherapy: Benefit with anti-PD-L1. Nat Rev Clin Oncol. 2017, 14(2):70-71.

[2] Targeting the PD-1 pathway: a promising future for the treatment of melanoma. Arch Dermatol Res. 2014, 306(6):511-9.