小鼠后肢结扎模型图片|鼠后肢缺血模型造模方法
下肢缺血作为周动脉疾病(peripheral arterial disease,PAD) 最重要的病理改变,是诱发众多临床症状的重要原因。因此,构建下肢缺血模型作为PAD 临床前模型,可以为探索改善PAD患者下肢血流灌注的治疗方法提供良好的工具。鼠后肢动脉结扎作为使用最广泛的鼠后肢缺血模型有着众多不可忽视的优点。该方法适用于实验室条件要求不高、操作简单的科研环境,并可参考已发表的论文以获取详细的操作流程或完整的操作视频。同时,此法易于找到目标动脉(尤其是股动脉),死亡率低 。这对于初次接触或尚不熟悉动物实验的研究人员来说十分友好。但该方法因有创导致的局部炎症、手术过程中的神经刺激及静脉创伤而被诟病。
鼠后肢动脉结扎造模:
鼠后肢动脉结扎是PAD 研究中使用最广泛的造模方法。
操作方法:
1、通常从鼠一侧后肢内侧切口,暴露后肢动脉并于结扎后离断以达到后肢缺血。
2、另一侧后肢作为对照用于造模评价中的对比而不进行手术操作。
3、鼠后肢动脉结扎因结扎方式、结扎次数、结扎位置以及离断与否而存在着多种不同的造模方式,同时也因上述因素造成了鼠后肢缺血模型血流恢复和血管新生模式的差异。
具体结扎方法:
根据结扎方式的不同可分为不可吸收尼龙线结扎法和电凝闭塞法。
根据结扎次数可分为单次结扎和双重结扎,也就是指结扎后肢动脉中的一支或两支,如单次股动脉结扎和股动脉与髂总动脉双重结扎。双重结扎比单次结扎造成的后肢缺血更严重,恢复时间也会更长。
结扎位置:
当不同的结扎位置也导致鼠后肢缺血情况的差异。现有的手术方法通常侧重于髂动脉 、 股动脉及其分支的结扎 ,其中部分手术方法对目标动脉周围静脉和神经进行了剥离 。
还有,对于双重结扎后是否离断两结扎部位间的血管,决定了模型的实验用途,如股动脉双重结扎离断术后的模型就不适用于评估动脉生成,但十分适合用于评估缺血性远端组织的血管生成。
根据结扎方式、结扎次数、结扎位置和离断与否对现有的鼠后肢动脉结扎模型进行分类,其方法主要包括单次股动脉电凝或结扎 、单次髂总动静脉电凝或结扎 、单次髂总动脉电凝或结扎、股动脉与髂总动脉双重电凝、股动脉双重电凝或结扎离断以及髂外动静脉和股动静脉双重结扎离断术 。这6种手术除了结扎方式、结扎次数、结扎位置以及离断与否不同外,手术操作手法基本相似,都是从腹部或腹股沟附近进行切开,暴露并游离出目标血管进行操作。该造模方法所使用的鼠类较为广泛,包括C57BL / 6小鼠 、C57BL/6遗传背景的基因敲除小鼠、BALB/c 小鼠 、Lewis大鼠和Wistar大鼠。
根据不同的PAD类型,研究者还会在鼠动脉结扎前对其进行干预已达到接近临床疾病,如下肢动脉硬化闭塞症模型会使用高脂高能饲料喂饲载脂蛋白 E( apolipoprotein E,ApoE) 基因敲除小鼠后手术,以及糖尿病性下肢缺血会先建立糖尿病鼠模型后再手术 。
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