（1）细胞株自身的成瘤性：不同细胞株的成瘤快慢会有差异，建议正式实验之前参考已发文献及实验室前期成瘤条件，设置不同成瘤条件摸索细胞株成瘤性；

（2）细胞接种时的状态及活率：建议取处于对数期生长的细胞进行接种，接种前对细胞活率进行检测，接种过程中细胞置于冰上，保持低温，接种完成后也可以留一小部分细胞检测细胞活率，确保接种过程中细胞活率没有明显降低。另外，注意避免体外过度传代影响细胞状态；

（3）支原体、细菌污染：建议接种前对细胞进行支原体和无菌检测；

（4）接种的剂量：不同的细胞系、不同的小鼠周龄和接种位置所需要的细胞剂量会有差异，建议正式实验之前摸索出最佳细胞注射剂量；

（5）接种方式：常用的接种部位有皮下、尾静脉和原位。原位多指肿瘤原发器官。建议根据细胞株成瘤性和实验目的选择合适的接种部位；

（6）选择的免疫缺陷小鼠：不同免疫缺陷程度的小鼠或不同周龄小鼠的成瘤速度有所差异，建议根据预实验结果选择合适的动物模型；

（7）其他辅助因子：根据细胞株类型选择实验中是否需要添加辅助因子，如雌激素依赖肿瘤接种时需要埋入雌激素片；

（8）适应性饲养：小鼠在运输过程中会产生应激反应，使小鼠出现一系列的病理生理学变化，这些变化会增加某些实验误差，因此在接到动物后应尽量避免立即进行实验，建议让动物有1~2周的适应期；

（9）饲养环境：免疫缺陷小鼠对饲养环境的要求很高，必须饲养在SPF级屏障设施内，且与免疫正常小鼠饲养在不同房间。如果环境设施不达标，有可能会间接影响肿瘤模型的制备：裸鼠长期暴露在弱抗原的刺激下，NK细胞等免疫细胞的活力逐步增强，会导致裸鼠对肿瘤的非特异性免疫力增强；NCG及NCG相关背景品系是重度免疫缺陷模型，对病原体易感，饲养环境清洁消毒不足，会造成环境微生物富集，对这一类小鼠带来健康风险。

荷瘤实验是否成功受很多因素的影响，以上建议仅供参考。另外，个体差异和肿瘤生长的速度不完全同步，实验中建议适当增加小鼠的富余量。

相同点：肿瘤组织或者细胞来源于癌症病人。

不同点：PDX是病人的肿瘤组织瘤块，保留了肿瘤的微环境和异质性，个体间差异较大，建模与临床更为接近，但PDX生长周期较长，均一性较差。药康大部分PDX样本为冻存状态，药效周期为：复苏接种小鼠生长至可传代（2-4个月）+传代后生长给药评价药效（2-4个月）共需约4-8个月时间，不同PDX肿瘤周期差异较大。

CDX是经过体外建立的稳定细胞株，细胞荷瘤均一性较好，个体间的一致性较高，但CDX生长较快，一般细胞扩大培养（10~15天）+接种小鼠给药评价（1.5~2.5个月），周期较短。

应用差异：CDX可用于药物的初期筛选，有前人研究结果，细胞背景比较清晰。PDX对于个体而言，可用于精准医疗药效预测，筛选更为合适的药物；对于药企而言，可用于药物受众的筛选，选择更加准确的适应症。

根据供体和受体的来源不同，分为两类。

1）异种移植模型（Xenograft transplantation model），选用人源的肿瘤，接种到免疫缺陷小鼠皮下，一般用于化疗药物、ADC药物、细胞治疗等筛选，若免疫缺陷小鼠进行人免疫系统重建，也可用于免疫治疗类药物筛选；

2）同种移植模型（Allograft transplantation model），选用鼠源的肿瘤，接种到免疫正常的同背景小鼠皮下，常用于大分子抗体、ADC药物、化疗药物及靶向药物评价。

1.1. 瘫痪

瘫痪的小鼠身体部分或全部行动能力丧失，是由于神经或者肌肉系统功能障碍导致的自主运动功能丧失。日常饲养、实验操作不当，如网格操作不当压迫小鼠腰椎或者手术、保定操作不当，造成脊髓损伤进而导致小鼠瘫痪。此外，病原感染，如多瘤病毒或脑脊髓炎病毒感染可能导致小鼠瘫痪。

对于瘫痪小鼠，需要在它触之可及的地方放置水和食物，更换柔软的垫料以免小鼠在垫料上拖行时造成皮肤损伤。当瘫痪小鼠出现体重骤降、褥疮或自残行为时，需及时进行安乐死。

1.2. 转圈、原地跳跃等刻板行为

刻板行为是一种功能失调的异常行为，通常因异常环境所致。常见的刻板行为包括转圈、网格磨牙、原地跳跃、旋转等。这些刻板行为没有任何功能性意义，具有高度持续性和重复性，并且随着时间推移该行为可能会逐渐强化。对于出现刻板行为的小鼠建议增加环境丰容以缓解刻板行为。

环尾

小鼠尾巴呈环形收缩、分节状，甚至出现水肿和坏死，有时也伴随足趾肿胀。传统上认为环尾是相对湿度低引起的环境疾病，但其他因素如温度、饮食不足、遗传易感性和笼养类型也可能引起环尾。对于环尾小鼠建议淘汰，同时注意环境，关注湿度控制。

1. 阴 道脱垂

小鼠发生阴 道脱垂时，可见会阴 部有粉色或红色的阴 道组织脱出，可能继发于阴 道增生，或过度的腹部收缩（产仔）。

轻微脱垂可以通过用高渗溶液处理暴露的组织以减少肿胀，还纳后持续观察；脱垂严重者建议安乐死。另外，出现过阴 道脱垂的小鼠不建议用作繁育。

2. 阴 茎脱垂

雄性小鼠的阴 茎脱出包皮之外，无法回缩，可能伴有阴 茎肿胀、破损、甚至坏疽。交配时阴 茎损伤、麻醉过量等均可能导致阴 茎脱垂。

阴 茎脱垂的动物无法进行正常交配，即使进行相应处理后，频繁的交配也会增加复发的概率，不建议用作繁育。

1. 腹泻

小鼠发生腹泻时粪便含水量较多，分为软便和水便两种情况。可通过观察粪便的性状、小鼠肛 门处粪便沾染情况等进行判断。

导致腹泻的原因有很多，包括：

(1) 环境因素：如动物处在应激状态（如冷刺激）

(2) 感染因素：多种病毒、细菌或寄生虫感染

(3) 营养因素：如某些微量元素缺乏

(4) 其他因素：如药物、化疗等

对于腹泻的小鼠，首先要排查病因、对症治疗。此外，对于腹泻小鼠需注意保暖和补水。

2. 直肠脱垂

直肠粘膜在直肠开口外外翻，在肛 门处可见一个红色组织，即直肠脱垂。

小鼠的远端结肠相对较短且支持较差，缺少浆膜覆盖。在该解剖学特性下，当小鼠发生腹泻、肠道肿块/肿瘤、增殖性/炎性盲肠炎、结肠炎时易发生直肠脱垂。此外，分娩或排便时的紧张用力、微生物或寄生虫感染等均可能发生直肠脱垂。

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1.1. 结膜炎

患有结膜炎的小鼠通常可见眼周皮肤红肿、流泪，甚至出现角膜浑浊。细菌感染和环境刺激（粉尘、氨气、消毒液等）均可能引起小鼠结膜炎。

日常饲养过程中保持笼盒内清洁可减少结膜炎发生的概率。对于患病小鼠，建议排查并去除病因，对患眼进行消毒处理（需要注意人为操作造成的交叉感染）。

1.2. 歪头

小鼠出现歪头多是由于前庭综合征引起的。引起前庭综合征的原因有多种，如遗传、中耳或内耳感染、肿瘤、脑膜炎、头部损伤、药物引起的耳毒性等。除部分病原引起中耳炎导致的歪头具有传染性外，多数情况下小鼠歪头为偶发，不存在传染性，一般不影响整群动物。

1.3. 牙齿咬合不正

小鼠出现牙齿咬合不正，也就是通常所说的牙长，主要有两种原因：

(1) 先天性，如C57BL/6背景小鼠或BALB/cJ和BALB/cByJ背景小鼠有一定概率发生先天性牙齿咬合不正。对于先天性牙齿咬合不正的小鼠建议淘汰，否则需要定期进行牙齿修剪。

(2) 因食物过软导致无法充分磨牙、牙齿过度生长。对此，需注意饲料硬度，可考虑增加磨牙玩具。

1. 皮肤颜色

小鼠皮肤颜色受毛发生长周期的影响，正常毛发的生长周期分为生长期 、退行期和休止期三个阶段。以 C57BL/6 小鼠为例：当毛发生长处于生长期、退行期和休止期时，与之对应的皮肤会分别呈现出黑色、灰色、粉色。因此，对于同一个品系的不同小鼠，因为毛发处于不同的生长周期，脱毛后可能会观察到皮肤呈现不同颜色。而对于不同毛色的品系小鼠，即使处于相同的毛发生长周期，所呈现的皮肤颜色也不相同。

毛囊生长周期不一致是小鼠皮肤颜色不均匀的原因。小鼠饲养过程中，外界刺激会影响皮肤颜色的变化，如局部理毛、人为剃毛等会导致局部毛发生长周期重新启动，进而使局部皮肤呈现不同的颜色，肉眼所见存在颜色斑驳。另外，激素、营养、情绪及药物等因素均对毛发周期也有一定的影响。

通常情况下，该现象对小鼠状态没有影响，如果进行皮肤相关研究，对小鼠皮肤有特殊要求，可提前沟通讨论需求。

2. 脱毛

导致小鼠脱毛的原因有以下几类：

(1) 机械性因素：如同笼小鼠剃毛或过度理毛；小鼠于笼具之间反复摩擦导致脱毛。

(2) 病理性因素：如螨虫、真菌等感染可能导致小鼠脱毛，可通过临床症状结合微生物检测进行确诊。

(3) 生理性因素：如激素水平失衡导致脱毛。

(4) 化学性因素：如季铵盐类消毒液可导致小鼠脱毛。

(5) 营养性因素：如必需氨基酸和维生素的缺乏可能导致小鼠脱毛。

其中，小鼠理毛造成的脱毛行为较为常见。B6及其相关品系易发生理毛行为，同窝鼠会互相理毛，造成胡须，背部，眼周，耳朵部位出现脱毛现象，压力、饲养环境、季节、饮食都可能导致该情况的发生。正常理毛裸 露部位的皮肤是正常的，无结痂或红肿，将鼠分笼后，一般后期毛发会自然长出。而过度理毛造成溃疡性皮肤损伤，建议以碘酒擦拭伤口，一天1-2次，一周左右可以改善。适当在笼盒内添加一些环境丰富物品给动物玩耍，比如添加纸杯、窝料、玩具，可减轻理毛现象。

3. 打架外伤

同种动物个体之间常由于争夺领地、食物、配偶而发生相互攻击或者打架。打架在雄性小鼠、雌性小鼠、繁殖笼中均存在，雄性小鼠中最常见，BALB/c、SJL和FVB等品系比较好斗。

打架引起的损伤包含创伤和脱毛。创伤通常出现在尾巴、下背部、臀部和生殖器，表现为创口、出血或者结痂。脱毛主要发生在下背部，上背部和臀部。

为了预防小鼠打架，可以增加笼盒内的环境丰荣（坐窝纸、福利玩具）、降低饲养密度、避免非同窝雄鼠同笼饲养、选择雌性或者温和品系小鼠进行实验，减少小鼠打架机率。如已有小鼠受伤，可以将受伤小鼠单独拎出饲养；如一笼内多只小鼠受伤也可以将“肇事者”单独拎出饲养。对于轻度外伤，可使用碘伏等局部清洁消毒处理或者抗生素治疗，加强观察；对于严重外伤者需安乐死处理。单独饲养的小鼠，除了给福利玩具，笼盒要放在其他小鼠中间，可看到其他的同伴，后期不建议再合笼饲养。

4. 溃疡性皮炎

由于皮肤瘙痒，小鼠过度抓挠该区域，造成表皮擦伤并可能继发感染机会性致病细菌，发展成深部溃疡。目前溃疡性皮炎的发病机制尚不清楚，已知多因素可能使小鼠易患溃疡性皮炎，包括遗传因素、年龄、性别、饮食、环境、体外寄生虫感染等。

对于轻度溃疡性皮炎的小鼠，清洁、消毒皮肤病灶，结合修剪小鼠后肢趾甲，可有效治疗轻度溃疡性皮炎。对于重度溃疡性皮炎，建议安乐死处理。

5. 毛发凌乱

健康的小鼠会定期理毛，被毛整洁、平滑而有光泽。小鼠出现毛发凌乱可能是存在某些问题未进行理毛，如因疼痛或疾病导致无力理毛；室内寒冷、营养不良、过度肥胖而无法理毛；特殊品系随年龄增长而出现毛发油腻、凌乱等。

6. 黄疸/苍白/青紫

皮肤苍白是贫血的表现。除相关疾病模型外（如镰刀红细胞模型），营养因素和感染因素也可能导致小鼠出现贫血。

皮肤黄染主要与肝胆相关疾病有关，如肝细胞功能低下、胆管梗阻等。

皮肤青紫即皮肤发绀，主要是血红蛋白氧含量不足所致。常见于低温、心力衰竭等情况。

对于出现黄疸、苍白、青紫等异常皮肤颜色的小鼠，建议安乐死。

7. 鳞状皮肤

鳞状皮肤多由皮肤过度角化引发，主要表现为皮肤干燥、粗糙，伴有菱形或多角形白色鳞屑，鳞屑紧贴皮肤，边缘轻度游离。

小鼠出现鳞状皮肤的原因有多种，包括：

(1) 感染性因素：如牛棒状杆菌、木糖葡萄球菌感染等。

(2) 基因突变：如银屑病小鼠模型。

(3) 物理因素：如紫外照射会导致裸鼠表皮细胞更新速度加快，角化过度，出现大量白色鳞屑。

(4) 化学因素：使用氮芥、咪喹莫特处理小鼠皮肤可能出现鳞状皮肤。

(5) 其他因素：包括环境湿度、营养因素等。

8. 肿物

小鼠身体各部分出现凸起或肿物，需要经兽医的专业初检、剖检甚至病理分析进行综合判断。肿物出现在皮下，可能是肿瘤、血肿、脓肿、气肿等；肿物出现在腹腔可能是怀孕、脏器异常等。