NCG是使用基因编辑技术敲除了NOD/ShiltJGpt小鼠的Prkdc（Protein kinase, DNA activated, catalyticpolypeptide）及 Il2rg（Common gamma chain receptor）基因而获得的重度免疫缺陷品系。Prkdc基因功能缺失造成T细胞和B细胞不能发育成熟。IL2RG是多种白细胞介素细胞因子受体的共同亚基，IL2RG失活则导致多种不同细胞因子信号通路缺失，造成NK细胞缺陷。因此，NCG是迄今为止免疫系统缺陷最为彻底的小鼠模型之一，缺乏成熟的T细胞、B细胞和NK细胞，暂未出现随着年龄的增长有免疫细胞渗漏的情况。

小鼠全身性辐照，尤其是X-RAY辐照，可能会出现辐照诱导的胃肠道综合征（Radiation-induced gastrointestinal syndrom），主要表现：小鼠肠壁变薄，胃肠道内的微生物侵袭引起胃肠道弥散性出血。另外，也可以考虑辐照前＞7d予以抗生素处理（集萃药康HSC重建小鼠生产目前未使用），辐照后密切关注动物的饮食、饮水及体重情况，必要时给予碎饲料或营养胶辅助进食，补充营养。

不同donor差异比较大，需要进行广泛的donor筛选。一般接种剂量1E7-2E7，发病时间7-21d都有可能，主要看donor的差异。这个筛选过程成本比较高，我司有筛选好的donor，客户可以考虑直接在我司开展药效实验。

这种情况是会出现的，由于细胞特性的不同、在动物体内生长环境和培养皿环境的不同，会带来细胞不同生长趋势的结果，也和细胞接种量、动物选择性有关。所以，建议对于新改造的或新购买的细胞，不要直接开展大规模的药效，而是先做小规模的成瘤性测试，摸索成瘤条件，避免造成不必要的损失。

可以的。客户需要提供支原体检测报告，我司会做支原体检测复核。因支原体是SPF动物房禁止带入的微生物，也会对成瘤性测试或药效实验带来不准确的实验结果。客户可提供该细胞的小样，支原体检测报告为阴性的时候，方可启动正式实验，正式实验细胞注射后还会留取小样再进行复核。

亚致死剂量的清髓（清除的不全是干细胞），目的是为了提高huHSC移植后小鼠体内的重建水平。PBMC为外周血单个核细胞，该方法可以在较短时间内实现快速的免疫系统重建，小鼠不需要提前清髓处理。

（1）细胞株自身的成瘤性：不同细胞株的成瘤快慢会有差异，建议正式实验之前参考已发文献及实验室前期成瘤条件，设置不同成瘤条件摸索细胞株成瘤性；

（2）细胞接种时的状态及活率：建议取处于对数期生长的细胞进行接种，接种前对细胞活率进行检测，接种过程中细胞置于冰上，保持低温，接种完成后也可以留一小部分细胞检测细胞活率，确保接种过程中细胞活率没有明显降低。另外，注意避免体外过度传代影响细胞状态；

（3）支原体、细菌污染：建议接种前对细胞进行支原体和无菌检测；

（4）接种的剂量：不同的细胞系、不同的小鼠周龄和接种位置所需要的细胞剂量会有差异，建议正式实验之前摸索出最佳细胞注射剂量；

（5）接种方式：常用的接种部位有皮下、尾静脉和原位。原位多指肿瘤原发器官。建议根据细胞株成瘤性和实验目的选择合适的接种部位；

（6）选择的免疫缺陷小鼠：不同免疫缺陷程度的小鼠或不同周龄小鼠的成瘤速度有所差异，建议根据预实验结果选择合适的动物模型；

（7）其他辅助因子：根据细胞株类型选择实验中是否需要添加辅助因子，如雌激素依赖肿瘤接种时需要埋入雌激素片；

（8）适应性饲养：小鼠在运输过程中会产生应激反应，使小鼠出现一系列的病理生理学变化，这些变化会增加某些实验误差，因此在接到动物后应尽量避免立即进行实验，建议让动物有1~2周的适应期；

（9）饲养环境：免疫缺陷小鼠对饲养环境的要求很高，必须饲养在SPF级屏障设施内，且与免疫正常小鼠饲养在不同房间。如果环境设施不达标，有可能会间接影响肿瘤模型的制备：裸鼠长期暴露在弱抗原的刺激下，NK细胞等免疫细胞的活力逐步增强，会导致裸鼠对肿瘤的非特异性免疫力增强；NCG及NCG相关背景品系是重度免疫缺陷模型，对病原体易感，饲养环境清洁消毒不足，会造成环境微生物富集，对这一类小鼠带来健康风险。

荷瘤实验是否成功受很多因素的影响，以上建议仅供参考。另外，个体差异和肿瘤生长的速度不完全同步，实验中建议适当增加小鼠的富余量。

相同点：肿瘤组织或者细胞来源于癌症病人。

不同点：PDX是病人的肿瘤组织瘤块，保留了肿瘤的微环境和异质性，个体间差异较大，建模与临床更为接近，但PDX生长周期较长，均一性较差。药康大部分PDX样本为冻存状态，药效周期为：复苏接种小鼠生长至可传代（2-4个月）+传代后生长给药评价药效（2-4个月）共需约4-8个月时间，不同PDX肿瘤周期差异较大。

CDX是经过体外建立的稳定细胞株，细胞荷瘤均一性较好，个体间的一致性较高，但CDX生长较快，一般细胞扩大培养（10~15天）+接种小鼠给药评价（1.5~2.5个月），周期较短。

应用差异：CDX可用于药物的初期筛选，有前人研究结果，细胞背景比较清晰。PDX对于个体而言，可用于精准医疗药效预测，筛选更为合适的药物；对于药企而言，可用于药物受众的筛选，选择更加准确的适应症。

根据供体和受体的来源不同，分为两类。

1）异种移植模型（Xenograft transplantation model），选用人源的肿瘤，接种到免疫缺陷小鼠皮下，一般用于化疗药物、ADC药物、细胞治疗等筛选，若免疫缺陷小鼠进行人免疫系统重建，也可用于免疫治疗类药物筛选；

2）同种移植模型（Allograft transplantation model），选用鼠源的肿瘤，接种到免疫正常的同背景小鼠皮下，常用于大分子抗体、ADC药物、化疗药物及靶向药物评价。